目的 探讨胼胝体-穹窿间入路切除第三脑室肿瘤的显微解剖学特点。方法 选取8例第三脑室肿瘤解剖样本作为研究对象，模拟手术操作步骤，在显微镜下观察第三脑室的解剖结构，测量以分别位于大脑半球内侧面中央沟上端前5 cm和7 cm的两点（P5、P7）为参照的相关径线、冠矢点至鼻根距离和丘脑中间块的相关径线。结果 冠矢点至鼻根距离为（128.30±3.87）mm；以P5点、P7点作为参照点，距胼胝体沟的距离分别为（38.64±3.59）mm、（37.39±2.98）mm，胼胝体厚度分别为（6.71±1.50）mm、（7.15±1.26）mm，胼胝体下缘至穹隆间距离分别为（8.45±2.60）mm、（10.18±1.69）mm，穹隆厚度分别为（4.06±0.55）mm、（5.13±0.68）mm，胼胝体下缘至室间孔距离分别为（15.62±2.83）mm、（15.68±1.80）mm，穹隆上缘嵌入胼胝体与胼胝体下表面相交点的连线距离分别为（12.84±2.09）mm、（18.46±2.70）mm，胼胝体膝内表面最前点与胼胝体下表面相交点的距离分别为（21.04±2.95）mm、（14.84±3.11）mm；前连合和孟氏孔上缘距离为（5.03±0.80）mm，丘脑中间块断面前后径为（5.75±0.78）mm，丘脑中间块断面上下径为（5.23±0.89）mm，丘脑中间块断面距前连合的距离为（9.62±1.37）mm，丘脑中间块断面距后连合的距离为（15.49±1.85）mm。结论 胼胝体-穹隆间入路是到达第三脑室较为直接、损伤较小的路径，可作为显微外科切除第三脑室肿瘤的重要手术入路。建议以冠矢点作为骨瓣后界，以胼胝体中部双侧纵纹在胼胝体表面形成的浅沟作为中线切开标志，从而可在显微镜下顺利抵达穹隆间。