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专家共识 | 更新时间:2018-09-03
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肿瘤坏死因子α对类风湿关节炎患者外周血单核细胞向破骨细胞分化的影响

广西医学 2018第40卷16期 页码:1782-1785

作者机构:中国人民解放军南京总医院中西医结合科

基金信息:【基金】军队系统国家中医药管理局重点专科(专病)建设项目(2007ZDZB001)

DOI:10.11675/j.issn.0253-4304.2018.16.02

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目的 探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)对类风湿关节炎(RA)患者外周血单核细胞向破骨细胞分化的影响。方法 采集RA患者外周血,密度梯度离心后经贴壁法纯化后获得单核细胞,分为A组、B组、C组、D组、E组、F组,分别加入核因子κB受体活化因子配体(RANKL)0 ng/ml+TNF-α 0 ng/ml、RANKL 100 ng/ml+TNF-α 0 ng/ml、RANKL 0 ng/ml+TNF-α 5 ng/ml、RANKL 100 ng/ml+TNF-α 2.5 ng/ml、RANKL 100 ng/ml+TNF-α 5 ng/ml、RANKL 100 ng/ml+TNF-α 10 ng/ml进行诱导培养。细胞培养14天后通过细胞形态学特征及抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色鉴定所得细胞,并对TRAP染色阳性细胞进行计数。免疫印迹法检测TRAP染色阳性的各组细胞核因子κB受体活化因子(RANK)、活化T细胞核因子c1(NFATc1)蛋白的表达。结果 TRAP染色显示,A组、C组获得的细胞不具有典型破骨细胞特征,B组、D组、E组和F组的细胞符合破骨细胞TRAP染色特征。D组、E组和F组TRAP阳性细胞计数、RANK及NFATc1蛋白表达均高于B组(均P<0.05)。结论 在缺乏RANKL的条件下,TNF-α不能独立诱导RA患者外周血单核细胞分化为破骨细胞,但存在RANKL时TNF-α能增加RANKL诱导生成的破骨细胞数量,这可能与其上调RANK、NFATc1蛋白的表达有关。

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