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论著·基础研究 | 更新时间:2018-05-15
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锌对人骨髓间充质干细胞体外增殖和成脂分化的影响

广西医学 2018第40卷08期 页码:928-933

作者机构:上海交通大学附属第六人民医院血液科

基金信息:【基金】国家自然科学基金(81570135)

DOI:10.11675/j.issn.0253-4304.2018.08.18

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目的 探讨锌对人骨髓间充质干细胞(hBM-MSC)体外增殖和成脂分化的影响。方法 用密度梯度离心和贴壁培养的方法分离纯化hBM-MSC,对照组加入不含锌的低糖杜氏改良格尔(DMEM)完全培养基,其余5个锌处理组加入锌浓度分别为0.001 mmol/L、0.004 mmol/L、0.016 mmol/L、0.064 mmol/L、0.256 mmol/L的含锌低糖DMEM完全培养基,用细胞计数试验(CCK-8)法检测细胞活性以确定适宜hBM-MSC培养的锌浓度。用含有适宜浓度硫酸锌的成脂诱导培养基体外诱导hBM-MSC成脂分化,21 d后行油红O染色观察细胞内的脂滴,检测吸光度值评价成脂分化效率,并采用实时荧光定量PCR检测各组细胞过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)、脂肪酸结合蛋白4(FABP4)、CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)mRNA表达水平。结果 0.256 mmol/L锌处理组的细胞活性低于对照组(P<0.05),0.004 mmol/L锌处理组和0.016 mmol/L锌处理组的细胞活性均高于对照组(P<0.05),适宜hBM-MSC培养的锌浓度为0.001~0.064 mmol/L。0.001、0.004、0.016和0.064 mmol/L锌处理组油红O染色阳性的细胞数依次增多,各锌处理组细胞中的脂滴明显大于且多于对照组,成脂分化率以及PPAR-γ、C/EBPα、FABP4 mRNA表达水平均高于对照组(均P<0.05)。结论 一定浓度的锌能促进hBM-MSCs的增殖和成脂分化,这可能与锌作用于成脂基因有关。

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