目的 构建含粉尘螨变应原第2组分（Der f 2）基因真核表达载体，并观察其在小鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）中的表达。方法 提取粉尘螨总RNA，采用反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）法扩增Der f 2基因，测序鉴定后将Der f 2基因克隆入pcDNA3.0质粒中，构建真核表达载体pcDNA3.0-Der f 2。将小鼠BMSCs分3组进行实验，包括pcDNA3.0-Der f 2转染组、pcDNA3.0空质粒转染组及未转染组，分别利用RT-PCR、蛋白免疫印迹法（Western blot）检测Der f 2基因及蛋白在3组BMSCs中的表达。结果 扩增的Der f 2基因序列与GenBank的参考序列完全一致，Der f 2基因正确克隆至真核表达载体pcDNA3.0中。转染BMSCs 48 h后，RT-PCR、Western blot检测结果显示，未转染组和pcDNA3.0空质粒转染组未检测到Der f 2基因表达，pcDNA3.0-Der f 2转染组检测到特异性条带，且大小与预期相符。结论 pcDNA3.0-Der f 2真核表达载体构建成功，Der f 2的mRNA和蛋白能在小鼠BMSCs中正确表达。