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论著·基础研究 | 更新时间:2015-06-25
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RNA干扰技术抑制人肝癌细胞POLD1基因表达的研究

广西医学 2014第36卷05期 页码:549-551

作者机构:广西医科大学附属肿瘤医院药学科; 广西医科大学研究生学院

基金信息:【基金】 国家自然科学基金资助项目(30950028);广西自然科学基金资助项目(2013jjAA40239)

DOI:10.11675/j.issn.0253-4304.2014.05.01

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目的 应用RNA干扰技术抑制人肝癌细胞SMMC-7721中POLD1基因的表达,探索该技术干预肝癌的可行性。方法 制备4个针对人POLD1基因的shRNA表达质粒,转染SMMC-7721细胞48 h后,荧光定量PCR法检测POLD1基因的表达,CCK-8检测细胞生长情况。结果 测序鉴定证实4个shRNA表达质粒构建成功,将其转染SMMC-7721细胞后,NEO-POLD1-1和NEO-POLD1-4表达质粒抑制效果明显,使SMMC-7721细胞的增殖受到抑制,并且使POLD1基因表达在mRNA水平抑制,NEO-POLD1-1相对表达量为(0.1425±0.0205),NEO-POLD1-4相对表达量为(0.209±0.009)。结论 针对POLD1基因设计的shRNA在体外有效地抑制了POLD1基因mRNA的表达和肝癌细胞的增殖,且实现RNA干扰具有序列选择性。

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