目的 构建基于黏蛋白1（MUC1）的非小细胞肺癌基因疫苗，并对其免疫原性进行评价。方法 利用弗林蛋白酶（furin）/2A序列将MUC1基因与粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）基因进行连接，克隆入真核表达载体pVAX1，构建基因疫苗pVAX1-MUC1-F2A-GM-CSF。对基因疫苗进行鉴定后将该疫苗体外转染COS7细胞，利用流式细胞术和酶联免疫吸附测定法（ELISA）分别对MUC1、GM-CSF的表达情况进行检测。将32只Balb/c小鼠分为空白对照组、空质粒pVAX1组、pVAX1-MUC1组和pVAX1-MUC1-F2A-GM-CSF组，每组8只。除空白对照组外，其余实验组每只小鼠肌肉注射相应质粒100 μg，并进行电穿孔刺激，末次免疫后14 d采用ELISA和酶联免疫斑点法分别检测其诱导的体液免疫和细胞免疫反应。结果 成功克隆并构建了非小细胞肺癌基因疫苗pVAX1-MUC1-F2A-GM-CSF，流式细胞检测结果显示MUC1在COS7细胞中的阳性表达率为10%，ELISA检测结果显示pVAX1-MUC1-F2A-GM-CSF组GM-CSF表达水平高于空载体pVAX1组（P＜0.05）。将疫苗免疫接种小鼠模型后，pVAX1-MUC1-F2A-GM-CSF组诱导的MUC1抗体水平高于pVAX1-MUC1组（P＜0.05），pVAX1-MUC1-F2A-GM-CSF组的小鼠脾细胞分泌干扰素-γ的斑点数多于pVAX1-MUC1组（P＜0.05）。结论 pVAX1-MUC1-F2A-GM-CSF能够同时诱导较高的体液免疫和细胞免疫反应。