目的 构建并鉴定微小RNA（miRNA）-1246慢病毒抑制载体，并探讨miRNA-1246下调对宫颈癌细胞增殖及侵袭的影响。方法 针对miRNA-1246成熟体的反义核苷酸片段设计引物并合成目的基因miRNA-1246-down，应用基因重组技术将目的基因克隆到空载质粒GV280中，通过酶切、PCR、DNA测序验证重组慢病毒质粒（GV280-miRNA-1246-down）的构建是否成功，将GV280-miRNA-1246-down、Helper 1.0、Helper 2.0共转染293T细胞获得重组慢病毒，浓缩提纯病毒液并检测病毒滴度，再用重组病毒液感染宫颈鳞癌细胞SiHa，通过检测绿色荧光蛋白（GFP）验证GV280-miRNA-1246-down在SiHa细胞的表达情况，用嘌呤霉素筛选GV280-miRNA-1246-down稳转细胞株。将SiHa细胞分为空白组（NC组）、阴性病毒组（NC-LV组）、miRNA-1246下调组（miRNA-1246-down-LV组），用细胞计数的方法检测细胞的生长率，用Transwell检测细胞侵袭能力。结果 （1）对菌落进行PCR鉴定筛选构建正确的慢病毒载体,DNA测序证实插入的基因序列正确。（2）慢病毒将目的基因miRNA-1246-down成功导入SiHa细胞中，同时达到稳定表达，转染率达90%以上，在荧光显微镜下能直接观察到GFP。（3）miRNA-1246-down-LV组 SiHa细胞增殖数低于其他两组（P＜0.05），细胞穿膜次数较其他两组减少（P＜0.05）。结论 miRNA-1246慢病毒抑制载体构建成功，miRNA-1246稳定下调的SiHa细胞株建立成功。在SiHa细胞中miRNA-1246下调可抑制宫颈鳞癌SiHa细胞的增殖以及侵袭能力。