目的 分析呼吸道感染婴幼儿肺炎链球菌的耐药性及青霉素结合蛋白基因（PBPs）突变情况。方法 收集呼吸道感染婴幼儿痰或咽拭子标本中分离出的24株肺炎链球菌，进行菌株鉴定和药敏试验。对筛选出的耐青霉素肺炎链球菌行耐药性分析，并提取菌株DNA后分析PBPs基因突变情况。结果 24株肺炎链球菌中，青霉素不敏感菌株有13株，占54.2%；13株青霉素不敏感菌株对对氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸和头孢呋辛不敏感率较高，分别为100%、76.9%和76.9%；对头孢噻肟、头孢曲松和头孢吡肟的不敏感率较低，分别为46.2%、38.5%和30.8%；对美罗培南和万古霉素的不敏感率最低，分别为15.4%和0。13株青霉素不敏感菌株未发现pbp1a基因突变菌株，5株存在pbp2b基因突变，占38.5%。结论 青霉素不敏感肺炎链球菌存在对多种抗生素耐药情况，而pbp2b基因突变可能是导致肺炎链球菌耐药的重要原因，应加强肺炎链球菌耐药性及PBP基因突变监测。