目的 对比不同温度下采用纤维黏连蛋白（FN）包被分离培养大鼠心肌干细胞（CSC）的效果，以筛选体外大鼠心肌干细胞的最佳分离培养方法。方法 选取健康新生Wistar大鼠，在无菌条件下取出心脏，分别经胰酶和Ⅱ型胶原酶反复消化后于FN包被的培养瓶中培养，将第3代CSC进行免疫组化细胞表面抗原鉴定。将在37℃及室温（22℃～25℃）下用FN包被培养的原代细胞分别设为A组及B组，在37℃及室温（22℃～25℃）下用FN包被培养的CSC分别设为C组及D组，比较A组与B组、C组与D组的细胞贴壁时间、首次传代时间及细胞倍增水平。结果 从新生大鼠心肌组织内成功分离培养出CSC，细胞表面抗原c-kit阳性率为83%。A组及C组的贴壁时间、首次传代时间分别均短于B组、D组（P＜0.05）。细胞倍增水平呈C组＞A组＞D组＞B组。结论 应用37℃FN包被培养瓶的方法分离培养原代大鼠心肌干细胞效果更优。