目的 构建人NLRP3真核表达载体并证实NLRP3融合蛋白在人心肌细胞中表达。方法 以人胎脑cDNA文库为模版,PCR扩增NLRP3全长编码基因,亚克隆至pCDNA3.1-myc-his A表达载体中。将构建的重组质粒测序并转染到人心肌细胞中,提取细胞蛋白进行Western blot检测。利用流式细胞仪观察Myc-NLRP3在人心肌细胞内的作用。结果 NLRP3全长基因序列克隆到了真核表达载体pCDNA3.1-myc-his A中,酶切鉴定片段大小为3 111 bp。Western blot检测到了融合蛋白Myc-NLRP3表达,分子量约为114 KD。Myc-NLRP3在人心肌细胞中过表达,能够促进细胞凋亡。结论 成功构建了Myc-NLRP3全长基因真核表达载体,过表达Myc-NLRP3能够促进心肌细胞凋亡。