目的 改进脂多糖(LPS)酶联免疫试验(ELISA)法检测方法,提高ELISA法的灵敏度及特异性。方法 将不同浓度(0 mg/ml、0.01 mg/ml、0.1 mg/ml、1 mg/ml、10 mg/ml、100 mg/ml)LPS(100μl)加样于预包被的ELISA板,筛选OD492较高的LPS浓度。按1∶2、1∶20、1∶50、1∶100、1∶200、1∶500稀释比例分别在每孔加入200μl牛酪蛋白、牛血清、山羊血清,筛选OD492较低的封闭液稀释比例。用优化的LPS浓度和封闭液稀释比例,比较牛酪蛋白、牛血清、山羊血清检测LPS灵敏度及特异性,筛选出最佳封闭液。结果 LPS在0.1 mg/ml以上时OD492较高,牛酪蛋白、牛血清、山羊血清在1∶100稀释比例时获得的OD492较低。选择1∶100稀释比例作为封闭液优化稀释比例。按1 mg/ml LPS浓度,1∶100稀释比例,山羊血清OD492显著高于其他封闭液(P<0.05)。按0 mg/ml LPS浓度,1∶100稀释比例,山羊血清OD492显著低于其他封闭液(P<0.05)。结论 以1∶100稀释比例的山羊血清作为封闭液的ELISA法对LPS具有较好的灵敏度及特异性。