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论著·基础研究 | 更新时间:2022-11-30
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miR-486-3p靶向DDR1对口腔鳞状细胞癌的抑制作用及槟榔致口腔鳞状细胞癌的可能机制

广西医学 2022第44卷20期 页码:2384-2390

作者机构:海南医学院第一附属医院口腔科

基金信息:【基金】国家自然科学基金(81760196)

DOI:10.11675/j.issn.0253-4304.2022.20.12

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目的 探讨miR-486-3p靶向盘蛋白结构域受体1(DDR1)对口腔鳞状细胞癌(OSCC)的抑制作用,并基于miR-486-3p和DDR1分析槟榔致OSCC的可能机制。方法 (1)收集20例原发性OSCC患者肿瘤组织及癌旁组织以检测miR-486-3p的表达水平。(2)取人口腔表皮癌(OEC)-M1细胞,分为对照1组(常规培养细胞,不给予任何特殊处理)、miR-486-3p mimic组(转染miR-486-3p mimic)、miR-486-3p inhibitor组(转染miR-486-3p inhibitor),以及对照2组(常规培养细胞,不给予任何特殊处理)、OE-DDR1组(转染过表达DDR1的慢病毒质粒)、sh-DDR1组(转染低表达DDR1的慢病毒质粒)。检测各组细胞增殖能力,以及活化型Caspase-3(cleaved Caspase-3)、Caspase-3蛋白表达水平。检测对照1组、miR-486-3p mimic组、miR-486-3p inhibitor组DDR1 mRNA的表达水平。(3)取HEK293细胞,分别转染miR-486-3p mimic和野生型或突变型DDR1 3端非翻译区。通过TargetScan数据库及双荧光素酶实验分析miR-486-3p与DDR1的结合情况。(4)取OKF4/TERT-1细胞,分为无槟榔碱组(不给予槟榔碱处理)和槟榔碱组(用槟榔碱连续刺激5 d),检测两组细胞miR-486-3p、DDR1 mRNA及蛋白表达水平。结果 (1)与癌旁组织相比,OSCC组织中miR-486-3p表达水平降低(P<0.05)。(2)与对照1组/对照2组相比,miR-486-3p mimic组/sh-DDR1组OEC-M1细胞增殖能力降低,cleaved Caspase-3表达水平升高,而miR-486-3p inhibitor组/OE-DDR1组OEC-M1细胞增殖能力增高,cleaved Caspase-3表达水平降低(均P<0.05)。与对照1组相比,miR-486-3p mimic组OEC-M1细胞的DDR1 mRNA表达水平降低,miR-486-3p inhibitor组DDR1 mRNA表达水平升高(均P<0.05)。(3)miR-486-3p与野生型DDR1存在结合位点。(4)与无槟榔碱组相比,槟榔碱组OKF4/TERT-1细胞中miR-486-3p表达水平降低,DDR1 mRNA和蛋白表达水平升高(均P<0.05)。结论 miR-486-3p通过靶向下调DDR1的表达,抑制OSCC细胞增殖,促进OSCC细胞凋亡,进而发挥抑癌作用。槟榔可能通过调控miR-486-3p和DDR1的表达从而诱发OSCC。

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