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论著·基础研究 | 更新时间:2022-07-19
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乳腺癌细胞外泌体对肿瘤相关成纤维细胞激活的诱导作用及机制

广西医学 2022第44卷10期 页码:1117-1124

作者机构:青海省肿瘤医院乳腺科;新疆医科大学基础医学院

基金信息:【基金】新疆维吾尔自治区自然科学基金(2018D01C339)

DOI:10.11675/j.issn.0253-4304.2022.10.13

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目的 探讨乳腺癌细胞外泌体对肿瘤相关成纤维细胞激活的诱导作用及机制。方法 (1)将乳腺上皮细胞MCF10A、乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231、PBS分别与成纤维细胞MRC-5共培养;另取上述细胞和PBS,在与MRC-5共培养的同时加入外泌体摄取抑制剂GW4869。检测共培养后MRC-5细胞的迁移能力,细胞中白细胞介素(IL)-1β、IL-6、 IL-8、 α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子β(TGF-β)、CXC基序趋化因子配体12(CXCL12)、Ⅰ型胶原蛋白α1链(COL1A1)、Ⅲ型胶原蛋白α1链(COL3A1)、Ⅳ型胶原蛋白α1链(COL4A1)的mRNA表达水平。(2)提取MCF10A、MCF-7和MDA-MB-231细胞的外泌体并鉴定,然后将上述细胞外泌体、PBS分别与MRC-5细胞共培养。检测MRC-5细胞的迁移能力,细胞中IL-1β、IL-6、IL-8、 TGF-β、 CXCL12、COL1A1、COL3A1、COL4A1的mRNA表达水平,以及细胞中核因子κB(NF-κB)信号通路相关蛋白的表达水平。结果 (1)相较于与PBS或MCF10A细胞共培养的MRC-5细胞, 与MCF-7、MDA-MB-231细胞共培养的MRC-5细胞迁移能力提高,IL-1β、IL-6、IL-8、α-SMA、TGF-β、 CXCL12、COL1A1、COL3A1、COL4A1的mRNA表达上调(均P<0.05);加入GW4869共培养后,各组细胞的迁移能力,以及IL-1β、IL-6、IL-8、α-SMA、TGF-β、 CXCL12、COL3A1、COL4A1的mRNA表达水平比较差异无统计学意义(均P>0.05)。(2)相较于与PBS或MCF10A细胞外泌体共培养的MRC-5细胞, 与MCF-7、MDA-MB-231细胞外泌体共培养的MRC-5细胞迁移能力提高,IL-1β、IL-6、IL-8、α-SMA、 TGF-β、 CXCL12、COL1A1、COL3A1、COL4A1的mRNA表达上调,且NF-κB磷酸化水平及NF-κB抑制因子α的蛋白表达水平均增加(均P<0.05)。结论 乳腺癌细胞外泌体可能通过激活NF-κB信号通路促进成纤维细胞向肿瘤相关成纤维细胞转化。

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