目的 探讨雷帕霉素对人骨肉瘤CD133+U2OS细胞增殖和干性维持的影响。方法 （1）自U2OS细胞中分离CD133+U2OS细胞，分为预对照组、低剂量雷帕霉素组和高剂量雷帕霉素组，分别加入含0 ng/mL、50 ng/mL和100 ng/mL雷帕霉素进行培养。干预24 h、48 h、72 h后检测各组细胞的增殖抑制情况，然后选择适宜的干预剂量和时间进行后续试验。（2）将CD133+U2OS细胞分为对照组和雷帕霉素组，分别使用不含雷帕霉素的培养基、含雷帕霉素的培养基培养。干预48 h后检测两组细胞中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、磷酸化mTOR及干性标志蛋白［SRY盒转录因子2(Sox2)、八聚体结合转录因子4(Oct4）］的相对表达量。结果 （1）与预对照组相比，低剂量雷帕霉素组和高剂量雷帕霉素组细胞的增殖均受到抑制，且随着干预时间的延长和剂量的增加细胞增殖抑制率有增高的趋势（均P＜0.05）。故在后续实验选择100 ng/mL雷帕霉素干预48 h。（2）雷帕霉素组mTOR、磷酸化mTOR、Sox2、Oct4的相对表达量均较对照组降低（均P＜0.05）。结论 雷帕霉素能够抑制人骨肉瘤CD133+U2OS细胞的增殖和干性维持，这可能与其降低mTOR信号通路活性有关。