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论著·基础研究 | 更新时间:2021-09-29
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慢病毒介导短发夹RNA干扰技术建立小鼠肺组织TRIF沉默模型

广西医学 2021第43卷14期 页码:1704-1707

作者机构:重庆医科大学附属儿童医院两江呼吸科;儿童发育疾病研究教育部重点实验室、国家儿童健康与疾病临床医学研究中心、儿童发育重大疾病国家国际科技合作基地、儿科学重庆市重点实验室;重庆医科大学附属儿童医院两江感染科

基金信息:【基金】国家自然科学基金项目(81800009,81300007)

DOI:10.11675/j.issn.0253-4304.2021.14.11

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目的 通过慢病毒介导的短发夹RNA(shRNA)干扰技术建立小鼠肺组织β干扰素Toll/白细胞介素1受体结构域衔接蛋白(TRIF)沉默模型。方法 构建TRIF的siRNA干扰质粒及慢病毒载体。将18只Balb/c小鼠随机分为空白组、实验组、对照组,每组6只。分别将含TRIF-shRNA、对照慢病毒载体的病毒液经鼻滴入转染实验组、对照组小鼠的肺组织。第8天处死小鼠取肺组织检测绿色荧光蛋白表达情况,取肺脏、肝脏、脾脏、肾脏、心脏组织检测TRIF mRNA和蛋白的表达水平。结果 实验组肺组织中可见明显绿色荧光蛋白表达,且肺组织中的TRIF mRNA和及蛋白表达水平均低于空白组及对照组(均P<0.05)。3组肝脏、脾脏、肾脏、心脏组织中的TRIF mRNA表达水平差异无统计学意义(均P>0.05)。结论 使用滴鼻方法可有效建立肺组织局部TRIF沉默小鼠模型。

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