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论著·基础研究 | 更新时间:2019-12-09
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异体输血诱发巨噬细胞分化失调对糖尿病大鼠创面愈合的影响

广西医学 2019第41卷21期 页码:2731-2737

作者机构:湖北省恩施土家族苗族自治州中心医院麻醉科

基金信息:【基金】国家自然科学基金(81760257)

DOI:10.11675/j.issn.0253-4304.2019.21.13

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目的 探讨异体输血所致巨噬细胞分化失调对糖尿病大鼠创面愈合的影响。方法 收集10只SD大鼠的静脉血并制成红细胞悬液,采用腹腔注射注入20只C57BL/6野生型小鼠体内,3 d后处死小鼠并收集骨髓,制备髓源性巨噬细胞(BMDM)后分别诱导其向M1型和M2型巨噬细胞分化。通过腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型(糖尿病组),共45只,另取45只健康SD大鼠为健康组,通过背部取皮建立创面模型。创面建模成功后,向两组大鼠先后注入向M1型、M2型巨噬细胞分化的BMDM悬液。分别于创面形成后5、10、15 d,每组取15只大鼠,观察创面愈合情况及创面组织中的炎症细胞浸润数量,检测创面组织中巨噬细胞表型标志物CD68+,白细胞介素12β(IL-12β)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的mRNA及蛋白表达。结果 两组大鼠的创面愈合率均随着观察时间的延长而升高,在创面形成后15 d时健康组大鼠的平均愈合率已达93.23%,而在各时间点糖尿病组的愈合率均低于健康组(均P<0.05)。创面形成后5 d,糖尿病组创面组织中炎症细胞计数、CD68+细胞数量少于健康组,而在创面形成后10、15 d多于健康组(均P<0.05)。创面形成后5 d,糖尿病组IL-12β、iNOS、TNF-α的mRNA及蛋白表达水平均低于健康组(均P<0.05);创面形成后10 d,糖尿病组IL-12β、iNOS的mRNA及蛋白表达水平均高于健康组(均P<0.05),而TNF-α的mRNA及蛋白表达水平低于健康组(均P<0.05);而创面形成后15 d,糖尿病组的IL-12β、iNOS、TNF-α的mRNA及蛋白表达水平均高于健康组(均P<0.05)。结论 异体输血诱发巨噬细胞分化失调时,对健康大鼠创面的正常愈合无影响,但会对糖尿病大鼠伤口的愈合造成不利影响,这可能与其创面持续存在炎症反应及巨噬细胞功能异常有关。

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