目的 探讨人成纤维样滑膜细胞原代培养的改良方法。方法 将骨关节炎患者的滑膜组织机械分离后用Ⅱ型胶原酶分别消化0 h、2 h、4 h、8 h、12 h、24 h。离心去上清，将细胞及未消化完全的组织块混合物转入培养瓶培养。待细胞贴壁后分别计数不同消化时间的贴壁细胞数，待细胞生长良好后，进行免疫荧光鉴定。结果 细胞生长状态良好，不同消化时间下培养24 h后均可观察到大量细胞贴壁且呈梭形，并可见成纤维样滑膜细胞从组织块下方爬出。经胶原酶消化12 h后的贴壁细胞数最多（P＜0.05）。免疫细胞化学染色显示培养的细胞波形蛋白和CD90/Thy-1阳性。结论 单独的Ⅱ型胶原酶消化法可以获得成纤维样滑膜细胞，最佳消化时间为12 h。